了解DNA合成儀的一般操作步驟
更新時(shí)間:2023-10-19 點(diǎn)擊次數:600
DNA合成儀用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長(cháng)的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應與相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。被廣泛應用在生物技術(shù)、生命科學(xué)實(shí)驗、基因治療、生物醫藥等領(lǐng)域。隨著(zhù)基因治療以及生物醫藥行業(yè)快速發(fā)展,預計未來(lái)一段時(shí)間我國DNA合成儀市場(chǎng)需求將繼續保持快速增長(cháng)態(tài)勢。
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類(lèi)儀器的一般操作步驟:1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時(shí)換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因為該溶劑用量較大。5)選擇結束方法:TritylOffAuto是儀器的原始狀態(tài),若打算以5,—DMT基團連接純化寡核苷酸,將其轉變?yōu)門(mén)ritylOnAuto結束狀態(tài)。6)選擇結束方法,一般為系統的原始狀態(tài)。7)在每個(gè)柱監視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。8)以代碼代替相應的DNA序列標記每一個(gè)收集瓶。11)運行StartColumn步驟檢查每一個(gè)柱的位置,確保合成儀上合成柱處于正確的位置。12)檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)是否充滿(mǎn)。13)如果分部收集器用來(lái)收集每個(gè)DMT脫保護步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開(kāi)分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。14)啟動(dòng)循環(huán),運行開(kāi)始程序清洗試劑管路,除去原來(lái)的試劑。