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    基因合成采用DNA合成儀可大幅縮短合成周期

    發(fā)布時(shí)間:2022/3/30      點(diǎn)擊次數:1020
       基因合成是指在體外人工合成雙鏈DNA分子的技術(shù)?;蚝铣墒怯萌斯し椒ê铣苫虻募夹g(shù),是基因獲取的手段之一,相對于從已有生物中獲取基因來(lái)說(shuō),且合成無(wú)需模板,因而不受基因來(lái)源限制。
      基因合成的方法主要采用固相亞磷酰胺三酯法,運用此方法的DNA合成儀有很多,常用的有Dr.Oligo 48/96/192/384基因合成儀,可以按照自己的方式配置儀器,最多可配置42種試劑瓶位(4個(gè)單體,6個(gè)標準合成試劑和32個(gè)特殊單體)。
     
      基因合成采用基因合成儀的優(yōu)勢
      1、可以保證基因序列的*正確性,無(wú)突變;
      2、合成周期短;
      3、不受模板來(lái)源限制;
      4、根據不同應用,設計優(yōu)化基因序列,提高表達水平;
     
      基因合成方法
      為了在基因合成前使基因在不同的生物表達系統中良好表達,研究者通常對基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化。 雖然遺傳密碼有64種,但大部分生物傾向于利用這些密碼子的一部分,常用的叫做最佳密碼子,不常用的叫做稀有或利用率低的密碼子。
      實(shí)際用于蛋白質(zhì)表達或生產(chǎn)的生物(包括大腸桿菌、酵母、哺乳動(dòng)物細胞、植物細胞、昆蟲(chóng)細胞)均表現出一定程度的密碼子偏好性,因此重組蛋白質(zhì)的表達可能受到密碼子利用的影響(尤其是在異源表達系統中)。
      在不改變其編碼蛋白的情況下,修飾一個(gè)蛋白的編碼基因,去除稀有密碼子,合理優(yōu)化其mRNA二級結構、GC含量等過(guò)程稱(chēng)為密碼子優(yōu)化。 密碼子優(yōu)化原理是根據所用表達系統的密碼子偏好性,對目標蛋白質(zhì)序列中的每個(gè)氨基酸選擇不同的密碼子進(jìn)行全序列組合,找出其中較好的。

    基因合成儀


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